我国血液学检验50年进展
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点击:4217日期:[ 2013/10/28 ]
传统的血液分析检查,完全用手工方法,包括将血液稀释用显微镜计数红、白细胞,沙利氏酸化血红蛋白法测定,血红蛋白及手工推片、染色、显微镜目测法做细胞分类,50年代库尔特先生利用电阻抗原理,设计了血细胞计数仪,使细胞的计数精密度提高3~5倍,避免了繁重的目力计数。同时50年代也生产了血红蛋白仪,利用碱化血红蛋白原理及30 g/L、180 g/L双标准校正仪器,同样可使测定速度及精密度提高数倍。北京医院于1959年引进瑞典生产的血细胞计数仪及血红蛋白仪,均系我国首次使用血液测定的仪器,并很快地总结了使用经验,由叶应妩教授在东北三省学术会上作了交流。
上海的工程师张根福通过对进口仪器的剖析,参考国外文献与国内科研单位协作,于1961年生产出国内第一台血细胞计数仪,随后南京无线电原件总厂、济南三联电子仪器厂、北京生化仪器厂先后生产了各种型号血细胞分析仪。
70年代由于计算机技术的快速发展,血液分析仪进展也很快,但早期开发的血小板计数仪不能将血小板与红细胞清晰分开,故必须用富血小板血浆进行测定,虽可测定血小板,但手续非常繁琐,此后由于检测技术进一步提高,检测范围从2fl至400fl可一起测定,加之浮动界标技术的应用,故可用全血进行血小板测定。
80年代血液分析进展迅速,在八项分析仪的基础上,红细胞体积分布宽度(RDW)及血小板平均体积(MPV)、血小板压积(PCT)、血小板体积分布宽度(PDW)均可进行测定,并且可将血小板、红细胞、白细胞的分布直方图打印出来,不仅可提供是否贫血的信息,而且可进一步对贫血的类型及原因提供有用的信息。血小板各项参数对止血与血栓疾病的诊断及一些疾病的疗效观察均有重要参考价值。在此期间陈宝梁等发表了**血小板计数及平均体积的参考值**、解放军总医院临检科对RDW在贫血的诊断、鉴别诊断及药物疗效观察方面的临床价值进行了系列研究。进入90年代,随着全自动仪器的广泛应用,应用静脉血取代末梢血进行血常规检查逐步在全国普及。北京市协作组7单位发表了**北京市2 013名正常人静脉血各种细胞成分参考值调查结果**,对仪器检测在临床上的应用及质量控制起到了推动作用。
白细胞分类的开发:初期是按细胞大小分成不同的群体,有分为2群的,大细胞相当于粒细胞,小细胞相当于淋巴细胞。有分为3群的,大细胞相当于中性粒细胞,小细胞相当于淋巴细胞,嗜酸、嗜碱及单核细胞均相当于中间型细胞。现在国内大多数实验室所用的血液分析仪均为二部或三部分类,此种仪器的所谓分类,只能起到过筛作用,当白细胞数过高、过低、白细胞直方图异常及其他信号时,则应做涂片染色显微镜检查。
由于激光、射频及化学染色技术的应用,一些高档仪器已可做白细胞的五部分类,如光电公司的激光法Celltacs 8108K型,亚培公司的CD-3000、CD-3500采用电阻抗与激光结合,库尔特公司的MAXA、STKS采用电阻抗、射频及激光技术,东亚公司的NE系列采用电阻抗及射频技术,SE-9000加用硫化氨基酸可检测幼粒细胞,拜尔公司的Technicon H系列采用化学反应与激光技术结合原理进行五部分类测定。
全自动血液分析仪的生产,从标本混匀、吸样、稀释、分配、测定及打印结果,全部自动完成,不仅节省人力、减少繁琐劳动,且由于避免了手工吸样,大大增加了测定结果的精密度。
由于改革开放,吸收国外先进经验,此期间大量引进了血液分析仪,多种型号(包括上述各型五分类)的仪器大量为各医院所采用,使我国的血液学分析有了很大的跨越。
90年代设计生产了专用的网织红细胞(网红)计数仪。80年代Tanke等就用流式细胞仪(FCM)进行网红计数,由于计数细胞量较手工法大大增多,因此其精密度大大提高。由于流式细胞仪在常规实验室中使用很少,所以库尔特公司、拜尔公司等设计了可进行网红计数的血液分析仪,非常方便临床应用。日本东亚公司设计生产专用网织红细胞计数的流式细胞仪,它不需要固定细胞,细胞与荧光素结合后即可进行测定,非常便于自动化测定。东亚公司R-2000、R-3000网织红细胞仪与拜尔公司Technicon H3还可根据网织红细胞的荧光强度,将其分成低荧光强度网织红细胞(LFR)、中荧光强度网织红细胞(MFR)及高荧光强度网织红细胞(HFR)三部分,幼稚网织红细胞显示强的荧光,随着网织红细胞成熟,其荧光逐渐减弱。
仪器法测定网织红细胞计数细胞量大增,使得精密度大大提高,对网织红细胞作为贫血治疗的监测指标其意义及可信程度大为提高。HFR和HFR+MFR作为骨髓移植、化疗、放疗的监测指标,其出现或增高均早于白细胞、粒细胞、血小板等常规监测指标,且不受感染、排异等影响。卫生部临床检验中心和解放军总医院分别使用R-3000网织红细胞分析仪和Technicon H3多功能血细胞分析仪,2种原理截然不同的分析仪器,进行了国内上述3种参数的正常参考值调查。结果显示:尽管调查群体和使用仪器不同,但正常参考范围极相近,分别为1.6%,11.8%,86.5%和2.6%,11.3%,86.1%。有作者对5例骨髓移植病人及18例肿瘤病人化疗前后各项血液细胞指标进行了观察,显示网织红细胞数特别是HFR有重要的临床价值。
90年代生产了血液学全自动系统。近年生产了自动涂片制备及染色的仪器,免除了涂片及染色中的手工操作,每小时可制备涂片120张,且可根据血液分析仪检测的红细胞压积,自动调整涂片血量、推片速度及角度,可得最佳的血涂片。
现代的全自动系统可将高档的全自动血液分析仪、网织红细胞分析仪及自动涂片染色系统组合在一起,再加上条型码及条码认读器,则可方便实验室的分析功能及流水作业完全自动化。下达指令后,仪器即可按照指令进行操作,且将有用的信息,如各标本现时的状况以及制备的涂片均可呈现于屏幕上,如需要即可打印出来。同济医科大学同济医院已使用血液学全自动系统。随着我国经济、科学的不断发展,我国血液分析技术一定取得更大的发展。